KACC 동결건조 앰플의 개봉

• KACC에서는 세균 전체와 곰팡이 일부를 동결건조 앰플 상태로 분양하고 있습니다. 앰플 상태의 건조 균체로부터 미생물을 재생하고자 할 때는 아래의 방법을 참고하십시오.

• 1. 앰플의 중간 부위에 검정색으로 표시된 흠집을 확인한다.
• 이 표시는 사용자의 편의를 위하여 글라스커터로 미리 내어 놓은 흠집이다.
• 2. 앰플 윗부분을 쥐고 앰플 바닥 부위를 테이블에 가볍게 두드려 앰플 내벽으로부터 건조 균체가 분리되도록 한다.
• 너무 세게 두드리면 흠집 부위에서 앰플이 깨지므로 주의한다.
• 3. 70% 에탄올을 적신 천이나 종이 타월로 앰플 표면을 닦아서 소독하고 앰플 전체를 감싼다.
• 앰플 개봉에 익숙하지 않은 사람은 개봉 과정 중 손을 다칠 수 있으므로 천이나 타월로 앰플을 감싸는 것이 좋다.
• 4. 그림과 같이 흠집이 몸체 바깥쪽에 위치하도록 쥔 후 양손 엄지손가락으로 밀면서 순간적으로 힘을 주어 부러뜨린다.
• 정상적인 앰플은 작게 ‘뻥’ 소리가 나며, 사용에 문제가 없다.
• 나무젓가락을 부러뜨릴 정도의 힘으로 개봉이 가능하며, 앰플 개봉이 힘든 경우, 흠집 여부, 개봉 자세 및 방향을 확인하며, 필요시 글라스커터로 흠집을 더 깊게 낸다.
• 5. 건조 균체를 멸균 증류수에 현탁한 후, 적정 배지에 접종하여 적정 조건에서 배양한다.
• 건조 균체는 0.2~0.5mL의 증류수에 현탁하여, 적정 배지에 접종하여 사용한다.
• 건조 균체 일부를 나누어 보관하는 경우 균주 활력이 감소되므로 한 번에 모두 사용한다. 부득이한 경우, 증류수에 현탁하여, 냉장 보관 후 수일 이내에 사용한다.
• 세균의 경우, 액체배지에 직접 접종하는 경우, 활력이 낮고 오염이 나타날 수 있으며, 추천하지 않는다. 고체배지에 획선도말 한 후, 형성된 콜로니를 액체배지에 접종한다.
• 곰팡이의 경우, 건조 균체를 MP(Malt Peptone: Malt extract 10g, Bacto-peptone 10g in 1L, pH 7.4 with KOH) 배지 2mL에 바로 접종하여 25℃에서 24시간동안 진탕배양한 후 세균오염 여부를 판단한다. 생장이 빠른 균주는 균사체 덩어리가 관찰되며 배지가 맑아진다. 배지가 여전히 뿌옇고 균사체가 없다고 판단될 경우에는 배지 일부를 취하여 광학현미경 하에서 세균 존재 여부를 관찰한다. 세균이 없다고 판단되면 배양액 일부 또는 균사체 덩어리를 취하여 적정 배지에 접종한다.
• 6. 사용한 앰플은 멸균해서 버린다.