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관찰과기록 / 화학적검사

화학반응에 사용하는 많은 종류의 화학시약(chemical reagent)은 부식시키고, 독성이 강하기 때문에 옷이나, 신체의 일부나 피부, 기타 현미경과 같은 기자재에 묻지 않도록 세심한 주의가 필요하다. 만약 시약을 흘리거나 묻었을 때에는 즉시 세척을 하여야 한다.
Chemical Test
  • 알콜(70-90%) : 건조표본을 원상태로 회복(reswelling)하는데 사용한다. 표 본을 1-2㎜로 얇게 잘라서 알콜을 넣은 용기에 3분 동안 침적한 후 증류수 에 2-3분 침적한다. 이것을 3회 정도 반복하면 표본은 거의 원상태로 회복 된다.
  • Teepol : 신선한 조직을 검경할 때 사용하면 불필요한 기포를 제거한다.
  • Melzer's Reagent(Melzer' soln.) : Iodine 1.5g, Potassium-Iodide 5g, Chloral hydrate100g을 H2O 100㎖에 혼합 용해한다(이때 따뜻하게 하는 것 은 좋으나 heating은 않 됨). 가장 폭넓게 사용한다.
    조직의 균사, 포자 등을 멜저용액으로 염색을 하면 Amyloid(회청색), Pseudoamyloid(갈색-적갈색), Inamyloid(무색-담황색)로 나타난다.
    예) Amyloid : 낭상체버섯속(genus Cystoderma)의 일부종의 포자, 무당버섯 속(genus Russula), 젖버섯속(genus Lactarius)의 포자표면의 ornamentations, 못버섯속(genus Chroogomphus)의 조직의 균사와 그물버섯 속(genus Boletus)의 일부 종의 조직의 균사가 회청색을 띤다. Pseudoamyloid : 꾀꼬리큰버섯속(genus Hygrophoropsis) 또는 우단버섯속 (genus Paxillus)의 포자 애주름버섯속의 일부 종의 균사 그리고 털가죽버섯 속(genus Crinipellis)의 갓표면의 hair가 적갈색으로 염색된다.
  • Acetocarmine : 아세토카민으로 엽색하면 만가닥버섯속(genus Lyophyllum), 밤버섯속(genus Calocybe), 덧부치버섯속(genus Asterophora)의 담자기 내 부에 흑자색-보라흑색으로 염색되는 입자가 있으면 siderophilous 또는 carminophilous라 한다.
  • Ammonium Hydroxide(NH4OH 3-10%) : 건조표본의 조직박편을 만들어 Ethanol(70-90%)과 물로 수분을 흡수시킨 다음 Slide glass상에 박편을 놓고 NH4OH 용액을 떨어뜨리면 세포의 크기나 모양이 원상태로 회복된다.
    이 외에 개암버섯속(genus Naematoloma), 독청버섯속(genus Stropharia)와 비늘버섯속(genus Pholiota)의 시스티디아가 노란색으로 염색되는 노랑시스티 디아(chrysocystidia)의 유무, 이끼살이버섯속(genus Xerophalina)의 조직과 눈물버섯속(genus Psathyrella)의 일부 위시스티디아(pseudocystidia)의 상단 의 두부 또는 점액성 그리고 애기버섯속(genus Collybia spp.)의 일부 조직이 록색으로 염색되고, 이끼살이버섯속(genus Xerophalina)의 측시스티디아 와 대시스티디아는 적색으로 염색된다.
  • Potassium hydroxide(KOH 3-5%) : 상기 NH4OH용액과 동일하게 사용한다.
  • Chloral Hydrate(50%) : 주름살 박편을 Acetocarmine 용액으로 염색한 후 에 본 용액으로 염색하면 에밀종버섯속(genus Galerina)의 포자반(plage of spores)을 명료하게 관찰할 수 있다.
  • Congo red(1-2%) : 균사의 세포벽을 염색한다. 일반적으로 Phloxine과 함 께 사용하며, 건조표본을 원상태로 회복시킨 조직의 박편을 슬라이드글라스 상에 놓고 상기 Congo red와 Phloxine을 1방울 씩 떨어뜨린 다음 Cover glass를 덮고, 과다 염색을 피하기 위하여 KOH(3%) 또는 NH4OH(3%)을 Cover glass의 한쪽 면에 떨어뜨리고 반대편에 필터페이퍼를 대고 Cover glass 아래 있는 용액을 흡수 한다.
    대부분의 주름섯목(order Agaricales)의 일부 조직, 포자 또는 시스티디아를 염색하여 관찰한다.
  • Phloxine(1-2%) : 균사의 세포질을 염색할 때 사용한다. 일반적으로 Congo red와 함께 사용한다.
  • Cresyl blue(0.5-1%) : 슬라이드글라스위에 Cresyl blue용액 1방울 을 떨어 뜨리고 조직(포자 포함)을 놓고 cover glass를 덮고 검경한다. 포자벽이나 균 사벽이 적색-violet색으로 염색된다. 이것을 Metachromatic이라한다.
    예) 큰갓버섯속(genus Macrolepiota)의 포자, 애주름버섯속(genus Mycena) 의 일부 종의 대의 균사, 배꼽버섯속(genus Melanoleuca)의 시스티디아벽, 볏 짚버섯속(genus Agrocybe)의 대부분 종의 조직균사, 송이속(genus Tricholoma)의 담자기 그리고 무당버섯속(genus Russula)의 일부 종의 포자 표면의 ornamentaion 등이 염색된다.
  • Guaiac : 70%알콜에 Gum Guaiacum을 포화시킨다.
    Guaiac 용액은 일반적으로 신선한 자실체위에 떨어뜨려 색변화를 관찰한다. 그 외에도 슬라이드글라스위에 Guaiac용액 1방울을 떨어뜨리고 조직(포자 포 함)을 놓고 cover glass를 덮고 검경한다(Inocybe의 일부종에서 cystidia의 결각을 관찰할 때 사용).
  • Cotton blue(Aman's solution, Aniline blue) : 1% cotton blue 용액 50㎖와 lactic acid 100g, phenol 100g, glycerine 150㎖ 그리고 H2O 50㎖를 혼합 하여 만든다.
    슬라이드글라스위에 Cotton blue용액 1방울을 떨어뜨리고 조직(포자 포 함)을 놓고 cover glass를 덮고 검경한다(이때 열을 가하면 염색이 잘된다).
    예) 자주방망이버섯속(genus Lepista)의 포자벽, 나팔버섯속(genus Gomphus)의 포자표면의 ornamentaion, 털가죽버섯속(genus Crinipellis)의 균사 벽이 짙은 청색으로 염색되며, 이러한 현상을 cyanophilous라 한다.